您好,現(xiàn)在蔡蔡來(lái)為大家解答以上的問(wèn)題。流式細(xì)胞儀的原理和操作過(guò)程，流式細(xì)胞儀的原理是什么相信很多小伙伴還不知道,現(xiàn)在讓我們一起來(lái)看看吧！

1、最近一直在了解流式細(xì)胞術(shù)和流式分選的知識(shí)，看到這個(gè)問(wèn)題想回答一下：流式細(xì)胞儀是以流式細(xì)胞術(shù)為基礎(chǔ)，快速精確的對(duì)單個(gè)細(xì)胞的理化性質(zhì)進(jìn)行定量分析和分選。

2、分析流程為：制備單細(xì)胞懸液，用特異性熒光染料標(biāo)記的抗體進(jìn)行染色，經(jīng)染色后的待測(cè)細(xì)胞在一定氣體壓力下被壓入流動(dòng)室，在鞘液的包裹下細(xì)胞呈單行排列，依次通過(guò)檢測(cè)區(qū)域，在激光束的照射下細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。

3、這兩種信號(hào)會(huì)同時(shí)被光電倍增管( PMT) 接收。

4、接收后可轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，通過(guò)模/數(shù)轉(zhuǎn)換器，將連續(xù)的電信號(hào)轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識(shí)別的數(shù)字信號(hào)，進(jìn)行分析。

5、如上所述，流式細(xì)胞儀是由液流系統(tǒng)、光路系統(tǒng)以及檢測(cè)分析系統(tǒng)三部分組成，部分儀器還具有分選功能，能對(duì)粒子進(jìn)行充電和偏轉(zhuǎn)從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞分選。

6、液流系統(tǒng)：通過(guò)產(chǎn)生壓力使含有目的細(xì)胞的樣本快速進(jìn)入儀器，在封閉的樣品管中利用樣品和鞘液之間的壓力差是樣本聚集到光學(xué)分析系統(tǒng)；光路系統(tǒng)：由不同的激光器發(fā)射出的激光照射到細(xì)胞表面產(chǎn)生光信號(hào)，而后經(jīng)過(guò)不同的光路系統(tǒng)被接收。

7、在流式照射室的分析點(diǎn)，激光照射到細(xì)胞表面發(fā)生散射和折射，并發(fā)射出散射光包括前向散射光（FSC）和側(cè)向散射光（SSC）,同時(shí)細(xì)胞表面的熒光素被激發(fā)發(fā)射出熒光。

8、前向散射光和側(cè)向散射光檢測(cè)器收集散射光轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)；熒光則被聚光器收集，不同顏色的熒光被雙色反光鏡轉(zhuǎn)向不同的光電倍增檢測(cè)器，將熒光信號(hào)也轉(zhuǎn)變成電信號(hào)。

9、FSC和SSC是流式分析中兩個(gè)非常基本的參數(shù)。

10、FSC的值能代表細(xì)胞的大小，細(xì)胞的體積越大則FSC就越大。

11、SSC則代表細(xì)胞的顆粒度，細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器和顆粒度越大則SSC越大。

12、檢測(cè)分析系統(tǒng)：熒光信號(hào)的強(qiáng)度代表了所測(cè)細(xì)胞膜表面抗原強(qiáng)度或細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的濃度，光信號(hào)轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識(shí)別的電信號(hào)。

13、計(jì)算機(jī)把所測(cè)量的各種信號(hào)進(jìn)行處理分析。

14、流式細(xì)胞分選是在流式細(xì)胞術(shù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行的。

15、在流動(dòng)室的噴口上方配有一個(gè)超高頻的壓電晶體，產(chǎn)生的振動(dòng)使噴出的液流形成均勻的液滴，待測(cè)細(xì)胞就分散在這些液滴之中。

16、將這些液滴充以正負(fù)不同的電荷（對(duì)標(biāo)有熒光素的細(xì)胞液滴帶以負(fù)電荷；未標(biāo)記熒光素的細(xì)胞液滴帶以正電荷；而不含有細(xì)胞的液滴則不被帶電荷），當(dāng)液滴流經(jīng)偏轉(zhuǎn)板時(shí)，在高壓電場(chǎng)的作用下偏轉(zhuǎn)，落入各自的收集容器中，不帶電荷的液滴落入廢液容器，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。

17、第一次回答希望能幫到你，如有理解不當(dāng)?shù)牡胤?，歡迎指正！。

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