您好,現(xiàn)在漢格來為大家解答以上的問題。液相色譜儀使用方法圖解，液相色譜儀使用方法相信很多小伙伴還不知道,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧！

1、高效液相色譜儀操作步驟： 1)．過濾流動相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜。

2、 2)．對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。

3、 3)．打開HPLC工作站（包括計算機軟件和色譜儀），連接好流動相管道，連接檢測系統(tǒng)。

4、 4)．進入HPLC控制界面主菜單，點擊manual，進入手動菜單。

5、 5)．有一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗泵和進樣閥。

6、沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。

7、沖洗進樣閥，需要在manual菜單下，先點擊purge，再點擊start，沖洗時速度不要超過10 ml/min。

8、 6)．調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。

9、點擊injure，選用合適的流速，點擊on，走基線，觀察基線的情況。

10、7)．設(shè)計走樣方法。

11、點擊file，選取select users and methods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。

12、若需建立一個新的方法，點擊new method。

13、選取需要的配件，包括進樣閥，泵，檢測器等，根據(jù)需要而不同。

14、選完后，點擊protocol。

15、一個完整的走樣方法需要包括：a.進樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘；b.基線歸零；c.進樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；d.走樣時間，隨不同的樣品而不同。

16、 8)．進樣和進樣后操作。

17、選定走樣方法，點擊start。

18、進樣，所有的樣品均需過濾。

19、方法走完后，點擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標記等。

20、全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。

21、 9)．關(guān)機時，先關(guān)計算機，再關(guān)液相色譜。

22、 10)．填寫登記本，由負責人簽字。

23、 高效液相色譜儀使用注意事項： 泵正常工作時，在流動相和流速不變的前提下柱壓應(yīng)該是穩(wěn)定的，當然在換流動相時壓力變化是正常的，正常情況下如果柱壓升高基本上都是由色譜柱使用時間長引起的（只有更換色譜柱），如果正常情況下壓力突然降低有可能是（1）接頭處有漏液的地方，采取的方法是有濾紙檢查，如有漏液的地方用扳手擰緊即可。

24、如果沒有漏液則可能是（2）白色的管子里面有氣泡從而導(dǎo)致流動相進不到泵里面去，采取的方法是排氣泡排氣時：先STOP停泵—打開排氣閥—按PURGE（快沖）鍵—等氣泡排完后先STOP停泵—擰緊排氣閥，其先后步驟不要搞反了。

25、 2、泵正常工作時最高壓力最好不要超過200KG，所以打開泵以后可以將泵的最大壓力調(diào)到200KG，這樣如果壓力超過上限則會自動報警停機，流速最好不用超過1ML/MIN，如果使用時壓力超過200KG，建議將流速調(diào)低點以降低壓力（在色譜柱正常的情況下），如果是因為色譜柱長時間使用造成壓力升高則建議更換色譜柱（因為色譜屬于耗材長時間使用就需要更換，更換的主要依據(jù)色譜柱出峰不正常或者柱壓力過高）。

26、 3、泵正常工作時平均每15天左右向注油孔加潤滑油2~3滴。

27、 4、流動相里面如果有鹽或酸類，做完實驗后要先用95%二次蒸餾水與5%甲醇洗色譜柱40分鐘左右，然后用純甲醇洗30分鐘左右才可以關(guān)機。

28、第二天如果繼續(xù)做實驗流動相里面仍舊有鹽或酸類，最好先用95%二次蒸餾水與5%甲醇過度20分鐘，再用流動相。

29、如果流動相里面只有甲醇，水，乙腈。

30、做完實驗后就不用95%二次蒸餾水5%甲醇沖洗，可直接用純甲醇洗30分鐘即可關(guān)機。

31、 5、C18色譜柱的耐酸PH值范圍3—8使用時不要超出。

32、 6、儀器長期不用時一定要將濾頭泡在甲醇里半月開機一次，如果開機時泵抽不上液可以打開排氣閥按PURGE快沖。

33、 7、調(diào)反壓器時要注意等液體流出來以后才能調(diào)一般調(diào)8—10KG，比如現(xiàn)在泵顯示屏顯示柱壓50KG那再增加10KG顯示屏上顯示柱壓60KG然后擰緊鎖緊螺母。

34、 8、色譜儀關(guān)機順序：清洗液路時可以把檢測器直接關(guān)機，清洗結(jié)束后先按STOP讓泵停止后在關(guān)電源不允許直接關(guān)機。

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